原位杂交仪实验原理及注意事项

原位杂交组织(或细胞)化学 简称原位杂交,属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,原位杂交仪在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分为DNA-DNA杂交,DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。

注意事项:杂交前1、取材后组织的固定要及时:避免细胞内DNA和RNA的降解,尤其是RNA降解较快。2、胃酶消化时间的控制:要根据组织切片的厚度和组织的类型调整消化时间。杂交中1、杂交过程不要干片,干片会导致探针结合不佳,导致背景偏高或假阴性结果。2、由于在手指皮肤及实验室用玻璃器皿上均可能含有RNA酶,为防止其污染影响实验结果,在整个杂交前处理过程中都需要戴消毒手套。杂交后1、杂交后的洗涤要充分,注意洗涤液洗涤的浓度和条件。2、DAB显色时间的控制:要用高质量的DAB显色液,这样既能保证染色结果也能减少背景色。好的DAB显色时间可以延长,不出背景就行。

随着社会的发展,现有医疗模式早已由传统的疾病治疗转变为养生保健、疾病预防、治疗康复多种方式相结合的模式。与此同时,人们也愈发追求药品性质中的“回归自然”与药品使用中的“绿色健康”。相较于化学药物,天然植物提取药物便展现除了得天独厚的优势。

据了解,植物提取技术是采用物理或化学提取手段,按照所需成分对植物进行提取,在不改变有效成分结构的情况下,浓缩或获得植物中的某一种或几种有效成分的技术手段。目前,植物提取手段有水提取、有机溶剂提取、超声波提取、微波提取、超临界萃取、膜分离多种。其中,超声波提取技术因提取时间短、温度低、效率高、药液杂质少,以及成本低、适应性广等独特优势,成为了一种高效、环保、节能的现代高新技术手段。据了解,超声波萃取器可用作植物的细胞破碎、有效成分萃取以及细菌的杀死或激活。

另外,植物提取物对生产条件、生产技术也有着较高的要求。据小编所知,多数小型制药企业受资金的局限,原位杂交仪人才短缺、技术装备落后,因此仍采用煎煮、回流提取等传统工艺,导致了提取过程中效率低、能耗大、物料浪费,以及提取液杂质多等问题。为获取高质量的植物提取物,植物有效成分的提取需经历植物高温灭酶、破碎、提取、沉淀、冻干、纯化等多个步骤。此时,人们所需要用到的仪器设备就有离心机、冷冻干燥机、分光光度计、高效液相色谱系统等。

不仅如此,分析检测技术也是植物提取物质量保证中的重要一环。在植物提取领域中,分析检测技术可实现植物提取物中有效成分、有害物质的定量分析的技术。除我们常见的高效液相色谱仪以外,气相色谱仪、气质联用仪、液质联用仪、原子分光等分析仪器与方法,也在该领域着广泛的应用。

据前瞻网消息,植物提取产业现已极大地带动了医药保健、化妆品、农业等多个下游产业的经济发展。其中,植物提取物作为中药制药的主要原材料,更是在医药保健领域中夺得“C位”。

与此同时,我们也不难发现,我国的植物提取产业中仍旧存在着资源浪费严重、企业技术力量差距大、产品质量检测方法混乱等缺点。但植物提取产业,作为我国的一个新兴产业,其巨大的发展潜力也有目共睹。相信,以丰富的植物资源为基础,由合理的政策法规引导,在人们需求的推动下,植物提取产业的发展定能持续向好。


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